Swe raðbrigða trypsín-EDTA lausn með fenólrauðu

Trypsín er serínhýdrólasi sem getur skorið af karboxýlenda lýsíns og arginíns í fjölpeptíðkeðjum. Trypsín meltingarefni eru notuð í vefjafrumuútdrætti, ræktun og in vitro frumuræktun til að vatnsrofa millifrumuprótein og sundra vefjum eða frumum í einstakar frumur. Hefðbundið trypsín fæst úr brisi dýra eins og svína og kúa. Uppruni hefðbundinna brisensíma og eiginleikar framleiðsluferlisins gera það að verkum að þau innihalda óhjákvæmilega óhreinindi úr dýraríkinu og hugsanlega veirumengun. Þessi vara notar raðbrigða svínatrypsín í stað hefðbundins trypsíns. Engin hráefni úr dýrum eru notuð í framleiðsluferlinu og hreinleiki og lífvænleiki raðbrigða svínatrypsínsins er tryggður með mörgum hreinsunarlotum. Þetta gerir það kleift að koma í stað virkni hefðbundins trypsíns, heldur einnig að nota til meltingar sérstakra frumna eða vefja þar sem stranglega er krafist dýralauss uppruna. Að auki inniheldur varan EDTA og fenólrauða vísa.

Skip með blautum ís; Geymið við 4 gráður fjarri ljósi í 12 mánuði. Ef varan er ekki notuð í stuttan tíma er mælt með því að geyma hana við -20 gráðu í lengri tíma.

Athugið: Eftirfarandi samskiptareglur eru aðallega notaðar fyrir viðloðandi frumur. Fyrir meltingu vefja þarf fyrst að skera vefinn í viðeigandi stærðir. Tíminn sem þarf til meltingar er mjög mismunandi eftir vefjum og yfirleitt er ráðlegt að vefir séu nægilega sundraðir eftir meltingu.

1. Fjarlægðu upprunalega frumuræktunarmiðilinn og þvoðu frumurnar 1-2 sinnum með PBS, sermifríum miðli eða öðrum jafnalausnum til að fjarlægja sermileifar;

2. Bætið við viðeigandi magni af raðbrigða trypsín meltingarlausn til að hylja frumurnar og meltið undir smásjá til að fylgjast með, meltingartíma flestra frumna á milli 30s-3mín; fyrir ómeltanlegar frumur, er hægt að setja í frumuræktunarræktunarvélina til að melta í ákveðinn tíma (meltingartími er aðeins til viðmiðunar, tiltekinn meltingartími ætti að vera ákvarðaður í samræmi við raunverulegar aðstæður).

3. Þegar frumur sýna verulega rýrnun eða formfræðilegar breytingar, sogið upp blönduðu trypsínmeltinu og bætið við hæfilegu magni af frumuræktunarmiðli sem inniheldur sermi til að stöðva meltinguna (ef erfitt er að losa frumurnar af botni plötunnar þegar þær blásar varlega með pípettara, þetta gefur til kynna að meltingartíminn sé ófullnægjandi og hægt sé að hefja meltinguna aftur með því að bæta við trypsín frumu meltingu. Forðastu ofmeltingu).

4. Safnaðu frumusviflausn í skilvindurör, skildu við 800-1200 rpm/mín í 3-5 mín., bætið við viðeigandi magni af frumuræktunarmiðli sem inniheldur sermi (valfrjálst).

5. Blástu varlega í frumur til að búa til frumusviflausn, sem hægt er að nota til yfirferðar eða síðari tilrauna.

1. Hægt er að nota þessa vöru beint fyrir meltingu frumna við 4 gráður. Hægt er að velja meltingarhitastig við stofuhita eða í hitakassa eftir þörfum, en vinsamlegast ekki forhita vöruna beint við 37 gráður. Endurtekin hækkun og lækkun hitastigs hefur ákveðin áhrif á ensímvirkni.

2. Eftir móttöku er hægt að geyma vöruna í skömmtum eftir þörfum; ef geyma þarf við -20 gráðu, forðastu endurtekna frystingu og þíðingu.

3. Meltingartíminn er breytilegur milli frumulína eða vefja, svo vinsamlegast athugaðu ákjósanlegan meltingartíma til að forðast of mikla meltingu í of langan tíma, sem getur haft áhrif á frumuvirkni og ástand.

4. Þessi vara er smitgát og til notkunar og hefur verið prófuð fyrir mycoplasma og endotoxín. Vinsamlegast gefðu gaum að smitgát meðan á notkun stendur.

5. Fyrir heilsu þína og öryggi, vinsamlegast notaðu rannsóknarfrakkinn og hanskana þegar þú vinnur.

Aðeins til rannsóknarnotkunar!