Vörukynning
|
Vöruheiti |
Köttur. Nei. |
Spec. |
|
2x Fast High Fidelity PCR Master Mix |
G3306-01 |
1 ml |
|
G3306-05 |
5×1 ml |
Vörulýsing/kynning
2x Fast High Fidelity PCR Master Mix er tilbúin til notkunar PCR forblanda sem inniheldur breyttan Ultra-High Fidelity DNA pólýmerasa, dNTP og fínstillt PCR hvarfstuðpúða. PCR mögnun er hægt að framkvæma með því að bæta aðeins við sniðmáti, grunni og ddH2O þannig að styrkurinn af Mix lausninni er 1×. Sterk mögnunargeta, hraður mögnunarhraði, framlengingarhraði allt að 5-15 s/kb, með mjög mikilli tryggð, tryggðin er 50 sinnum hærri en Taq DNA fjölliðun og 6 sinnum hærri en Pfu DNA fjölliðun, og mögnunarafurðin er flatur. Loading Dye hefur verið bætt við vöruna, og mögnunarvöruna er hægt að nota beint til að greina agarósa gel rafdrætti. Þessi vara er hentugur fyrir PCR mögnun á hefðbundnum PCR, nýlendu PCR, flóknum sniðmátum og sniðmátum með hátt GC innihald.
Geymslu- og sendingarskilyrði
Skip með blautum ís; Geymist við -20 gráðu, gildir í 12 mánuði. Forðist endurtekna frystingu og þíðingu.
Innihald vöru
|
Hluti |
G3306-01 |
G3306-05 |
|
2×Fast High Fidelity PCR Master Mix |
1mL |
5×1 ml |
|
Handbók |
Eitt eintak |
|
Prófunarreglur / verklagsreglur
Mælt er með PCR hvarfkerfi
|
Hluti |
20 μL |
50 μL |
Lokastyrkur |
|
Sniðmáta |
Breytilegt |
Breytilegt |
eins og krafist er |
|
Áfram grunnur (10μM)b |
0.8μL |
2μL |
0.4μM |
|
Reverse Primer (10μM)b |
0.8μL |
2μL |
0.4 μM |
|
2×Fast High Fidelity PCR Master Mix |
10μL |
2μL |
1× |
|
(DMSO, valfrjálst)c |
(0.6μL) |
(1.5μL) |
(3%) |
|
ddH2O |
Bætið við 20μL |
Bætið við 50μL |
a:Ef sniðmátið er plasmíð eða frá bakteríufrumum er mælt með 50ng-5pg bætt í 50 μL rnx. Ef tempalted er erfðafræðilegt DNA er mælt með 250ng-50ng bætt í 50 μL rnx. Ef sniðmát er cDNA, þynntu upprunalega cDNA þitt um 2-100 sinnum og rúmmál þynnts cDNA sem bætt er við hvarfið er ekki meira en 10% af heildarmagni hvarfsins. Hærra magn af sniðmáti hefur tilhneigingu til að leiða til ósértækrar mögnunar. Lægra magn af sniðmáti hefur tilhneigingu til að leiða til lítillar PCR mögnunarvirkni.
b:Bráð endanlegur grunnstyrks sem notaður er er {{0}}.2-1.0 μM, og mælt er með 0,4 μM. Of lítill primer getur leitt til lítillar eða engrar mögnunarafraksturs og of mikill primer getur leitt til ósértækrar mögnunar.
c: Fyrir sniðmát með hátt GC innihald er hægt að bæta við DMSO með ekki meira en 10% heildarmagni.
1. Ráðlögð PCR mögnunarskilyrði
|
Skref |
Hitastig |
Bindi |
Hringrásir |
|
Upphafleg denaturationa |
98 gráður |
30 s |
1 |
|
Denaturation |
98 gráður |
15-30 s |
25-35 |
|
Hreinsunb |
50-72 gráðu |
15-30 s |
|
|
Framlengingc |
72 gráður |
5-15 s/kb |
|
|
Endanleg framlenging |
72 gráður |
5-10 mín |
1 |
|
Haltu |
4-16 gráðu |
Að eilífu |
a: 30 sekúndur fyrir afeitrun er hentugur fyrir flest hefðbundin sniðmát; flókin sniðmát geta verið eðlisvötnuð í allt að 2 mín.
b:Til mögnunar á flóknum sniðmátum, sem innihalda samtengda grunna, er hægt að lengja blöndunartímann í allt að 30 sek.
c: Ráðlagður framlengingarhraði fyrir plasmíð og önnur einföld sniðmát er 5-10 s/KB; Ráðlagður framlengingarhraði hefðbundins erfðafræðilegs sniðmáts er 10-15 s/KB; Flókið sniðmát 15-30 s/KB.
Athugið
1. Þiðið vandlega og blandið saman fyrir notkun. Það má geyma það við 4 gráður í að minnsta kosti 2 vikur til að forðast frost-þíðingarlotur.
2. Til öryggis og heilsu skaltu nota öryggisgleraugu, hanska eða hlífðarfatnað.
Aðeins til rannsóknarnotkunar!
maq per Qat: 2 x hröð hátryggð pcr master mix, Kína 2 x hröð high fidelity pcr master mix framleiðendur, birgjar, verksmiðju

