Eins og orðatiltækið segir, “Upplýsingar ákvarða árangur eða bilun.„Stundum getur lítil færni í tilraunum skipt miklu máli.
Próteinmerki: Samanstendur af próteinum með mikla hreinleika með þekktum mólmassa, það þjónar sem „höfðingi“ til að gefa til kynna mólmassa markpróteinsins og getur einnig sýnt hvort himnaflutningurinn er árangursríkur og umfang rafskauts próteins á hlaupinu. Að velja réttan próteinmerki er einnig eitt af nauðsynlegum skilyrðum fyrir árangur Western blot (WB) tilrauna.
I. Sem stendur er hægt að skipta merkjum nokkurn veginn í þrjár gerðir:
1.. Ómeðhöndlað merki: Það inniheldur hvorki litar sameindir né merkingarsameindir, hefur engan lit og getur ekki fylgst með stöðu rafskautsins og himnaflutningsáhrif próteina, en það gefur til kynna mólmassa nákvæmlega.
2.. Prestined merki: Þetta inniheldur litarefni og prótein, sem gerir þau sýnileg með berum augum. Þú getur beint fylgst með framvindu rafskautsins og athugað hvort himnaflutninginn sé lokið, sem gerir þær nokkuð oft notaðar. Hvert merkisband er samtengt með litarefni, sem gerir kleift að fylgjast með rauntíma á rafskautum og himnafærslu, svo og áreiðanlegri staðsetningu markpróteinsins. Athugið að mólmassa fyrirfram litaðra merkja getur aðeins verið frábrugðið raunverulegum mólmassa þeirra.
3. Þróað próteinmerki: Þessir merkingar innihalda IgG bindistaði sem geta bundist við aðal- eða aukamótefni sem notuð eru til að greina markpróteinið. Þetta gerir próteinmerkinu kleift að birtast á himnunni við hliðina á markpróteinbandinu. Venjulega eru tvær for-litaðar hljómsveitir með í rauntíma athugun á rafskautum og framförum himna og til að meta skilvirkni og stefnu flutnings.
II. Hvernig á að velja próteinmerki?
Í fyrsta lagi skýra tilrauna tilganginn. Ef þú þarft aðeins að fylgjast með stærð próteinbanda eftir rafskaut, fáðu nákvæma próteinmólþyngd, eða greina á milli nátærðra hljómsveita, er hægt að nota óstöðlu próteinmerki. Ef hann framkvæmir WB tilraun er hægt að velja forstillt próteinmerki til að fylgjast með rafskautum og himnafærslu í rauntíma.
Hér eru nokkrir þættir sem þarf að hafa í huga þegar þú velur viðeigandi próteinmerki:
1. Mólmassa svið: Próteinmerki eru flokkuð í há, lágt og breið mólmassa svið. Merki með háum mólmassa eru oft notaðir til að greina stór prótein, en lágt mólmerkjamerki eru notuð fyrir minni prótein eða peptíð. Ef þú þarft sveigjanleika á rannsóknarstofunni þinni, getur það að velja breiðan mólmassa með jafnt dreifðum hljómsveitum hjálpað þér að bera kennsl á prótein í hvaða mólmassa svið sem er.
2.. Nákvæmni band: ServiceBio High-Opoom raðbrigða próteinmerki eru tilvalin til notkunar sem sameindaþyngdarstaðlar í SDS-PAGE og Western blot forritum.
3. Gæði og stöðugleiki: ServiceBio merki gangast undir margvíslegar skolanir og langan ræktunartíma án taps á bandinu eða hverfa. Þeir hafa mikla sækni í himnuna og tryggja stöðugan hljómsveitarlit og áreiðanlegar niðurstöður.
